Р. Т. Маннапова, Д. В. Свистунов, Е. М. Ленченко

Восстановление иммунного статуса и микробиоценоза продуктами пчеловодства при развитии кандидоза у перепелов

Монография

ebooks@prospekt.org

Информация о книге

УДК 619:636.59

ББК 48.47:46.8

М23

Авторы:

Маннапова Р. Т., доктор биологических наук, профессор кафедры микробиологии и иммунологии Российского государственного аграрного университета МСХА имени К. А. Тимирязева;

Свистунов Д. В., кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры ветеринарной медицины Российского государственного аграрного университета МСХА имени К. А. Тимирязева;

Ленченко Е. М., доктор ветеринарных наук, профессор кафедры ветеринарной медицины Российского биотехнологического университета (РОСБИОТЕХ).

В монографии представлены результаты многолетних исследований механизмов оптимизации процессов формирования кроветворения, естественной защиты, перестроек морфофункциональных структур и иммуноклеточных реакций в центральных и периферических органах иммуногенеза и колонизационной резистентности кишечника перепелов под влиянием биологически активных продуктов пчеловодства – БАПП (экстрактов восковой моли, трутневого гомогената и прополиса), степени и характера их восстановления на фоне развития кандидозов пищеварительного тракта. Определена степень повышения продуктивности и улучшения качественных показателей мяса, сохранности поголовья здоровых перепелов под влиянием БАПП и на фоне развития кандидозов пищеварительного тракта.

Текст публикуется в авторской редакции.

В оформлении обложки использованы изображения из личного архива автора и с ресурса Shutterstock.com

УДК 619:636.59

ББК 48.47:46.8

© Маннапова Р. Т., Свистунов Д. В., Ленченко Е. М., 2025

© ООО «Проспект», 2025

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Биологические особенности японских перепелов – как модели для научных исследований

Перепела отличаются низкой стоимостью разведения, малыми размерами тела, коротким промежутком между поколениями (3–4 поколения в год). Время от момента закладки яиц в инкубатор до вылупления птенцов занимает 17 дней. Развитие перепелов происходит быстрее, чем у других домашних птиц. На 10-й день они начинают менять оперение, которое полностью формируется к 25-му дню. К 330-суточному возрасту перепела становятся взрослыми. К 40–45-м сут. они начинают откладывать яйца. Расходы корма для получения 1 кг мяса составляют 3,5–3,6 кг, а для получения 1 кг яичной массы – 2,6 кг. Корреляция перепелиной яичной массы в течение года в 24 раза превосходит массу тела (у кур-несушек в 8 раз). Они восприимчивы к обширному спектру условий содержания – довольно устойчивы к инфекционным заболеваниям. При этом перепелиные яйца также устойчивы к микроорганизмам, что обеспечивает их продолжительное хранение. Перепелиные яйца обладают противоаллергическими свойствами и содержат значительное количество калия, фосфора, железа, а также витаминов В1 и В2. Перепелиное мясо характеризуется сочностью, нежностью и считается диетическим продуктом. Перепелки откладывают яйца с интервалом до 30 часов, обычно после полудня, поздним вечером или ночью. Оплодотворенность яйца достигает 70–85% (Бидее Б. А., 2016; Орда М. С., Ляднович Ю. О., 2017; Яковлева Д. К., 2018; Способ выращивания перепелов.., 2019; Нестерова А., Микитов А., 2020; Селезнев С. Б., 2022; Макарцев Н. Г., 2017; Djitie Kouatcho et al., 2015).

Период жизни перепелов при клеточном содержании составляет до 10 лет. В настоящее время зарегистрировано 34 породы перепелов с различными изменениями, такими как разнообразие окраски яиц и оперения, различная структура пера и другие модификации. Эти мутации не оказывают влияния на продуктивные показатели перепелов, за исключением небольшой замедленности роста у птиц с белым оперением. В Российской Федерации наиболее популярны яичного направления японская порода и мясного – порода фараон, а также их гибриды (полученные в результате скрещивания московской селекции японских перепелов). Этот гибрид характеризуется более крупным весом тушки – от 120 до 125 г и высокой яйценоскостью, достигающей до 290–300 яиц в год. Японские перепела служат наиболее удобной моделью для исследования, благодаря этому они обширно используются в науке. Кроме того, часто исследованиям в птицеводстве препятствуют ограничения в финансовой составляющей, времени и месте – большинство из этих вопросов можно решить с помощью перепелов японской породы (Коршунова Л. Г. и др., 2016; Гогаев О. К. и др., 2017; Мясное птицеводство в…, 2018; Дулина А. С., 2019; Тагиев А. А. и др., 2019; Современное состояние и…, 2022).

Японский перепел принадлежит к отряду Galliformes и семейству Phasianidae. Считается отдельным видом от обыкновенного перепела (Coturnix coturnix), который мигрирует по Европе, Азии, Африке и Индии. Японский перепел не имеет близкого родства с аборигенным североамериканским перепелом (Colinus Virginianus) или калифорнийским перепелом (Lophortyx California). Считается, что перелетные обыкновенные перепела были одомашнены в Китае где-то в XI веке, а затем завезены в Японию в XII веке. На протяжении сотен лет этих перепелов разводили в Японии в первую очередь из-за их пения, а позже они были завезены в Китай, Корею, Тайвань, Гонконг и Индокитай. В 1900-х годах японцы разводили перепелов для производства яиц и мяса. Японский перепел был впервые описан как исследовательская модель в 1959 году, которые отметили его практичность в качестве лабораторного животного для изучения развития птиц (Бидиев Б. А., 2016; Ройтер Я. С. и др., 2017). Японские перепела служат удобной исследовательской моделью, благодаря этому они обширно используются в многочисленных исследованиях (Трансгенная птица – создание…, 2019; Способ повышения жизнеспособности…, 2021; Козикова Л. В. и др., 2022; Ratnamohan et al., 1985).

Сочетание трансгенной технологии с прямыми экспериментальными методами позволяет исследователям динамически отображать широкий спектр клеточных событий на протяжении всего развития и оценивать временные и пространственные закономерности экспрессии генов, проводить эксперименты быстрее и с меньшими затратами, чем аналогичные работы на мышах или курицах (Способ повышения жизнеспособности.., 2021; Козикова Л. В. и др., 2022; Макарова Л. О. и др., 2022).

Понимание вопросов миогенеза, васкулогенеза, ангиогенеза, скелетогенеза, заживления ран и вирусологии существенно продвинулось в результате исследований на птичьих эмбрионах. Исследователи использовали 17-дневный период развития японских перепелов для изучения влияния микрогравитации на эмбриональное развитие во время кратковременных космических полетов. Взрослые японские перепела фигурируют во многих исследованиях в области этологии. Многочисленные лаборатории использовали перепелов в качестве модели для исследования возрастных заболеваний. Короткая продолжительность жизни японского перепела в сочетании с его физиологическим сходством с человеком сделали эту птицу идеальной моделью для исследований старения в иммунологии, эндокринологии и репродуктивной биологии. Кроме того, C. japonica использовалась для изучения фотопериодизма и циркадного контроля функции мозга, уровня циркулирующих половых гормонов и репродуктивной активности. Японский перепел также участвует в исследованиях репродуктивной токсикологии химических соединений и воздействия эндокринных разрушителей окружающей среды (Коршунова Л. Г. и др., 2019; Мусаев А. М., 2019; Ratnamohan et al., 1985).

Размер, форма и цвет яиц японских перепелов значительно различаются у самок. В целом яйца весят около 12 г и имеют бело-коричневый пестрый вид. Большинство лабораторий заказывают оплодотворенные перепелиные яйца у местных коммерческих поставщиков. Важно хранить яйца, которые не будут сразу инкубироваться, в прохладном холодильнике при температуре около 13°C. Температура 4 °C слишком низкая для хранения яиц и приведет к высокой смертности. В холодильнике должен быть поддон с водой для поддержания умеренного уровня влажности. Оплодотворенные перепелиные яйца следует хранить с большим концом в пластиковых яйцевых плоскостях или папье-маше. В таких условиях яйца можно успешно хранить в течение 2 недель, но для достижения наилучших результатов авторы рекомендуем использовать оплодотворенные яйца как можно скорее после их поступления в лабораторию. При сохранении племенной семьи взрослых перепелов яйца от племенных пар можно собирать ежедневно и хранить в аналогичных условиях. Загрязненные яйца можно слегка промыть водой комнатной температуры, а затем опрыскать 70%-ным этанолом. После высыхания свежие яйца можно хранить или инкубировать так же, как и яйца коммерческого происхождения (Сайду С. Ш., 2016; Савчук С. В. и др., 2018; Чимидов Ш. Ю. и др., 2019; Щербатов В. И. и др., 2018; Бачинина К. Н. и др., 2021; Ндайкенгурукийе Д. и др., 2021;).

Перед закладкой яиц инкубатор должен поработать несколько дней, чтобы установить постоянную температуру 37,5 °C и относительную влажность около 50%. Сроки эмбрионального развития строго зависят от температуры –37,5 °C. Колебания выше или ниже этой температуры ускоряют или замедляют развитие соответственно. В начале инкубации оплодотворенные перепелиные яйца весят около 12–13 г. Яйца теряют примерно 13% своего веса по мере продолжения эмбрионального развития. В течение первых 13 дней инкубации лотки для яиц следует постепенно наклонять примерно один раз в час на угол 90°, начиная с горизонтального положения. Этот процесс способствует нормальному развитию. Для оценки жизнеспособности японских перепелиных яиц можно использовать коммерческую свечу. Пятнистая пигментация скорлупы яиц японских перепелов затрудняет метод просвечивания, однако жизнеспособность можно надежно определить примерно через 7 дней инкубации. На 14 и 15 дни инкубации яйца не должны быть под наклоном – это позволит эмбриону сориентироваться в правильном положении для вылупления, при этом голова будет находиться рядом с воздушной камерой, расположенной в большом конце яйца (Рахманов А. И., 2016; Щербатов В. И. и др., 2017; Рехлицкая Е. К. и др., 2019; Бачинина К. Н. и др., 2020).

Оптимальные условия для вылупления – температура 37 °C и относительная влажность около 70%. Более высокая влажность, которой можно достичь, поставив в инкубатор дополнительные поддоны с водой, не дает птенцам прилипать к оболочкам скорлупы во время вылупления. Влажность измеряют с помощью мокрого гигрометра, который собирают из качественного термометра с колбой, оплетенной чистым фитилем, насыщенным дистиллированной водой. На 16-й день инкубации яйца следует уложить на бок в инкубационные лотки. Дно лотков должно быть покрыто мягкой впитывающей бумагой, которая обеспечит хорошее сцепление цыплят во время их вылупления. Если материал подкладки слишком гладкий или скользкий, у вылупившихся детенышей появятся растопыренные ноги, что является фатальным заболеванием. Как только птенцы начнут проклевывать скорлупу, инкубатор следует держать закрытым, чтобы поддерживать высокий уровень влажности. Вылупление обычно происходит в течение нескольких часов. Не рекомендуется помогать птице в процессе вылупления, так как это может привести к аномалиям развития (Османян А. К. и др., 2017; Чимидов Ш. Ю. и др., 2019; Османян А. К., Малородов В. В., 2021).

После того, как птенцы выходят из скорлупы, они отдыхают в течение нескольких часов и обсыхают в течение следующих суток. Перепела рано развиваются и вскоре встают на ноги с широко открытыми глазами. Птенцы перепелов обычно весят около 10 г. В течение первых 24 часов пребывания в выводном шкафу ни корм, ни вода не требуются, поскольку вылупившиеся птенцы получают питание из желточного мешка, который всасывается в их брюшную полость в последние дни эмбрионального развития. Важно вести точную таблицу, содержащую даты вылупления, номера полос и другую соответствующую информацию.

Вопросы кормления и составления рационов для перепелов разных возрастных категорий рассмотрены и описаны в исследованиях различных ученых (Шмидт, Г.О., 2011; Шерстюгин, М.А., 2016; Курченкова О. Р. и др., 2017; Колесень, В.П., 2017; Кретов, А.А., 2018; Изменения органолептических показателей…, 2019; Баранова, Б.Х., 2018; Сковородин, Е.Н. и др., 2021; Драму Форомо, 2022; Селезнев, С.Б. 2021, 2022; Медведский, В.А., 2026). Их исследования охватывают вопросы кормления и формирования рационов для перепелов различных возрастных групп.

Вылупившихся птенцов необходимо держать в тепле во время их транспортировки к брудерам в виварии. Первоначально рекомендуется устанавливать температуру в брудерах на уровне 37 °C и выстлать пол впитывающей бумагой. Птенцам предоставляется свободный доступ к воде. Поилки должны быть заполнены шариками или подобным материалом, чтобы цыплята не утонули. Рекомендуется придерживать температуру в брудере 37 °C в течение 1 недели. В дальнейшем температуру понижаем на 2–3 °C каждую неделю в течение 3 недель (Шилов С., 2017; Радченко М. Н., 2019).

В возрасте 3–4 недель пол большинства птиц колонии уже легко определить по окраске грудных перьев. Однако пол некоторых особей не очевиден до тех пор, пока они не достигнут половой зрелости. У самцов перья на груди имеют однородный ржаво-коричневый цвет, тогда как у самок перья на груди охристые с темно-коричневыми пятнами, что придает им пестрый вид.

Обращение со взрослыми перепелами относительно несложное; однако, испугавшись, птицы прыгают вертикально в полет и могут поранить голову о крыши своих клеток. Взрослые особи колонии перепелов весят в среднем около 250 г. Чтобы максимизировать яйценоскость, поголовье должно получать 14 часов света и 10 часов темноты каждый день при комнатной температуре 22 °C. Количество дневного света является важным сезонным сигналом для воспроизводства перепелов (Ройтер Я. С. и др., 2021).

Японские перепела начинают достигать половой зрелости примерно в 8-недельном возрасте. Здоровая племенная пара должна давать около 4–5 яиц в неделю в течение 1 года. За это время получаем 90% плодовитости и 80% выводимости от заводчиков. Постоянное спаривание часто приводит к потере спинных и шейных перьев, но это, не оказывает отрицательного влияния на их продуктивность. Через 1 год яйценоскость и плодовитость медленно снижаются (Кротова Е. А. и др., 2016; Мусаев А. М., 2019; Бессарабов Б. Ф., 2021).

Японские перепела могут быть восприимчивы ко многим распространенным заболеваниям домашней птицы, включая, помимо прочего, птичий грипп и гепатит. Перепела также восприимчивы к патогенным штаммам бактерий, таких как Salmonella pullorum и Escherichia coli, а также к грибковой инфекции, вызываемой Aspergillus fumigatus.

Японские перепела, как лабораторные животные, имеют две нежелательные характеристики. Во-первых, геном японского перепела до сих пор не секвенирован. Это может ограничить полезность перепелов для лабораторий, которым требуется полный набор онлайн-геномных ресурсов. Однако исследователи пришли к выводу, что геном перепела очень гомологичен геному курицы. Во-вторых, давно известно, что C. japonica не переносит обширного инбридинга. Повторное спаривание братьев и сестер снижает жизнеспособность, выводимость и яйценоскость. Для поддержания пригодности стада необходимо регулярно вводить новые источники генетической изменчивости (Иванов А. В., 2016; Кротова Е. А., 2016; Ленев С. В., 2016; Селезнев C. Б., Татаренко Я. С. и др., 2016; 2016; Якимова Э. А., 2016; Татаренко Я. С. и др., 2017; Внутренние болезни животных…, 2019; Большунов В. А., 2020; Цитология, гистология, эмбриология…, 2020).

1.2. Биологически активные продукты пчеловодства, их роль и значение

1.2.1. Восковая моль – биология развития и возможности его применения в медицине и ветеринарии

Большая восковая моль Galleria mellonella относится к семейству Pyralidae. Быстрота размножения, многочисленное потомства, короткий цикл развития и его геном, связанный с иммунитетом транскриптом обеспечивают удобную исследовательскую модель для исследования иммунитета насекомых на микробиологическом, биохимическом и молекулярном уровнях. Иммунитет Galleria, состоящий только из врожденных механизмов, демонстрирует адаптивную пластичность, которая в последнее время стала предметом интенсивных научных исследований. Это насекомое часто используется учеными в исследованиях патогенности микроорганизмов и тестах in vivo на эффективность отдельных факторов вирулентности, а также новых антимикробных соединений (Колосова С. Ф., 2016; Кароматов И. Д., 2016; Филиппов И. Н., 2018; Маннапова Р. Т. и др., 2021; Капунин В. П., 2023; Пересторонина В. Р. 2023).

Большая восковая моль была впервые описана в колонии Apis cerana (восточная или азиатская медоносная пчела) – диких медоносных пчел, найденных в Южной и Восточной Азии. Будучи космополитическим видом и вредителем пчелиных колоний, она распространилась почти на все континенты (за исключением Антарктиды), обычно покрывая большинство или все их территории. Ее появление в основном связано с пчеловодством в отдельных странах: в 27 странах Африки, 9 – в Азии, 5 – в Северной Америке, 3 – в Латинской Америке, Австралии и Новой Зеландии, в 33 странах Европы и почти во всех его крупных островах. Ожидается, что распространение вида будет продолжаться в связи с изменением климатических условий (Кроматов И. Д., 2020; Магеррамов М. М., 2022; Борьба с восковой…, 2023; Осокина А. С. и др., 2023; Honeybee health in… 2015; Hantawannakul P. et al., 2016).

G. mellonella является типичным голометаболическим насекомым, то есть оно проходит четыре стадии развития в своем жизненном цикле, а именно яйцо, личинка, куколка и взрослая особь. Яйца, склеенные вместе, откладываются партиями от 50 до 150 или даже от 175 до 355. Они овальные, вначале белые и затем кремовые или бледно-розовые. Размеры яиц: длина от 0,44 до 0,47 мм и ширина от 0,29 до 0,39 мм. Примерно за 4 дня до закрытия личинка видна как темное кольцо. За двенадцать часов до вылупления полностью сформированная личинка хорошо видна через тонкий хорион.

Личинка G. Mellonella относится к полигоду (эруциформному или гусеничному) и перипнеустному типу. Тело состоит из головы, трехсегментной грудной клетки и брюшной полости из 11 сегментов. На сильно склеротизированной голове есть жевательные ротовые части и четыре стебля с каждой стороны – они яркие, овальные и отделены друг от друга. Наличие стеблемата на голове личинки G. Mellonella является важным диагностическим характером, который отличает личинку этого вида от личинки меньшей восковой моли Achroia grisella, то есть еще одного пиралида и пасеки, который не имеет этой особенности (Ellis, Graham and Mortensen 2013; Kwadha et al., 2017; Desai et al., 2019).

Личинки чаще всего вылупляются утром, выживаемость яиц колеблется примерно от 84 до 100%. После вылупления личинки перемещаются из трещин и щелей в соты, где они начинают питаться и строить защитные шелковистые трубки, разрушая при этом структуру сот. Направленное движение и кормление, вероятно, стимулируются химически. При отсутствии пищи может быть и каннибализм (Способ борьбы с.., 2008; Сидорова К. А., 2014; Курышев В. П., 2020).

В естественных условиях личинки G. Mellonella питаются сотами, которые содержат значительное количество пчелиного воска, немного меда, эксувии пчелиных личинок и остатков пыльцы. Из такой пищи они получают большое количество энергии, но относительно мало белка. Если количество пищевого белка падает ниже определенного уровня, личинки перестают прясть шелка, вероятно, из-за отсутствия незаменимых аминокислот для синтеза белка шелка. Содержание белка также влияет на скорость развития личинок. Их рост происходит быстро на старых сотах, которые содержат пчелиных личинок и пыльцу и очень медленно на новых сотах (Перспектива производственного получения…, 2020; Осокина А. С. и др, 2022; Биологичекси активные вещества…, 2022).

Когда личинки полностью вырастают они перестают питаться и энергично перемещаются в поисках подходящих, безопасных мест, где они могут прикрепить кокон. В активных ульях это в основном пространства за сотами (например, внешние поверхности пчелиных рам или внутренние поверхности стен улья). Деревянные части улья часто являются местами, где строятся коконы. Полностью взрослые личинки выкапывают характерные для вида впадины в форме лодки в древесине, которые могут ослабить всю структуру пораженных частей улья. Строительство кокона занимает в среднем 2 дня. Кокон защищает сначала личинку, а затем куколку от рабочих пчел и возможных паразитов, а также стабилизирует абиотические условия (Осокина В. С. и др., 2019). Внешний слой кокона вскоре становится твердым, а внутренний остается мягким. В передней части кокона личинка делает выходное отверстие для будущей взрослой особи. Однако непосредственно перед окукливанием это отверстие закрывается тонким слоем шелка. Построив кокон, личинка становится неактивной за несколько часов до окукливания, проходя через недолговечную стадию развития, известную как препупа. Цвет куколки меняется с возрастом от белого (сразу после куколки) до желтого и коричневого и темно-коричневого через 4 дня. Тело умеренно удлиненное, в 3,1–3,5 раза. Глаза большие и хорошо видны. Антенны длинные, слегка изогнутые спереди, обычно простирающиеся до края второй пары крыльев (задних крыльев). Соответствующие средние размеры самки куколки значительно больше, чем у самца куколки: длина – 15,83 и 11,86 мм; ширина – 4,17 и 3,17 мм. В зависимости от температуры и влажности, стадия куколки в G. Mellonella длится от 8 до 50 дней.

Вылет взрослых особей из коконов наблюдается ночью и поздним вечером. Покидая коконы, они выталкивают шелковые крышки, закрывающие выходные отверстия коконов. Освободившись от кокона, взрослые остаются неактивными до тех пор, пока их крылья не будут полностью расширены и затвердены. Сначала моли кремово-белые, позже темнеют до серого цвета. Часто отмечается, что G. Mellonella предпочитают темные места, пытаясь спрятаться.

Взрослые особи неспособны употреблять пищу, потому что их ротовые части вырождены, живут не очень долго, от 7 до 30 дней, в зависимости от условий окружающей среды, самцы живут – (21–30 дней), чем самки (8–15 дней).

В отличие от большинства мотыльков, взрослые особи G. Mellonella имеют уникальное спаренное поведение. Самцы заманивают самок двухкомпонентным феромоном и, кроме того, издают короткие звуковые импульсы, которые могут играть значительную роль в выборе репродуктивных пар. Они генерируют этот акустический сигнал, используя структуры, расположенные на крыльях. Самки реагируют на звук, раздувая крылья, хотя они не могут найти его источник. Сексуальные феромоны, которые высвобождаются самцами в ответ на движения женского крыла, помогают в этом, в конечном итоге привлекая своих партнеров перед спаривания. Самцы начинают издавать звуковые импульсы после захода солнца, звук никогда не издает в присутствии его естественных хозяев (т. е. медоносных пчел).

Яйцекладка начинается в течение относительно короткого времени после появления и спаривания взрослых особей. Самки обычно входят в улей ночью, когда пчелы уже неактивны. В улье мотыльки ищут различные трещины и щели на сотах или других частях улья, насколько это возможно. Найдя подходящее место в улье, самка максимально растягивает живот, расширяя кончик как можно глубже. Описанная выше стратегия минимизирует обнаружение яиц пчелами или возможными паразитами и увеличивает выживаемость личинок, вылупившимся из них (Осокина А. С. и др., 2016; Осокина А. С. и др., 2019; Клочко Р. Т. и др., 2019).

Период развития от яйцекладки до появления взрослых особей составляет от 32 дней до 93 дней. Поскольку эта моль обычно живет в довольно стабильной микросреде (например, улей, склад) в отношении преобладающих абиотических условий, она может периодически производить от четырех до шести поколений в год (Перспектива производственного получения…, 2020; Гусак Е. В., 2022; Алиева Ф. Ш., 2022).

Личинки большой восковой моли широко используются во многих аспектах иммунологических исследований. Это связано с тем, что это насекомое отвечает большинству требований к модельным организмам. Их можно легко и недорого выращивать в больших количествах в лаборатории без какого-либо специального оборудования. Размер личинок позволяет точно вводить необходимое количество патогенов и органов для отбора проб для дальнейших исследований: гемолимфы, гемоциты, жировое тело, трахею и кишечник. Наконец, относительно быстрая продолжительность жизни дает следующие поколения в течение нескольких месяцев. G. Mellonella очень удобна для биохимических исследований, так как можно легко получить 20–40 мкл гемолимфы из одной личинки, которая, объединенный из группы гусениц. Кроме того, легко сделать белковые экстракты из жирового тела G. mellonella, гемоцитов и других органов. Наконец, поскольку большая восковая моль является моделью не позвоночных, нет никаких этических формальностей для ее использования в качестве мини-хозяина (Останина Е. С., 2007; Гайдай Г. С. и др., 2020; Величкина С. К., 2022).

В последние годы наблюдается рост интереса к иммунитету от насекомых. Вероятно, это вызвано большей осведомленностью о преимуществах выяснения иммунных механизмов у этой группы животных. Есть несколько основных причин, по которым ученые используют насекомых в исследованиях иммунитета. К ним относятся: анализ взаимодействия хозяина и патогена; понимание врожденных иммунных механизмов; тестирование факторов вирулентности патогенов человека; тестирование антимикробной активности новых лекарств in vivo; и поиск биоактивных молекул, например, с противомикробной, противовирусной и противораковой активностью и для использования в качестве биопестицидов (Колосова С. Ф., 2016; Гайдай Д. С., 2017; Шикова Ю. В. и др., 2017; Бабаджанова З. Х., 2020; Шикова Ю. В. и др., 2020; Елисеев В. В., 2021; Поправко C. А., 2021; Осокина А. C. и др., 2023; Пестронина В. Р., 2023; Olivia L., 2016; Kavanagh K. et al., 2018; The studying of… 2019).

1.2.2. Особенности биологической активности трутневого гомогената

«Элементный портрет» животных и птиц, точно так же как и человека, зависит от их окружающей среды, в которой они обитают, так как поступающие в организм химические элементы связаны с водой, кормом и воздухом (Муравьев Д. В., 2016; Перспективы использования адаптогенов…, 2016; Калачинская А. М. и др., 2019; Червяков Д. Э., 2019).

Принято считать, что с точки зрения содержания белка, трутневый расплод аналогичен маточному молочку. Вместе с тем, наблюдается выраженная разница в коэффициентах окисляемости. Трутневый расплод включает в себя наименьшее количество ненасыщенных соединений, что подтверждается показателем окисляемости, связанным с наименьшим количеством деценовых кислот (Кароматов И. Д., 2020; Комарова Н. В. и др., 2021).

Согласно выводам Л. Л. Демино и др. (2017), деценовые кислоты в личинках преимущественно присутствуют в связанном состоянии, аналогично эфирам, таким как миристиновая, пальмитиновая, стеариновая и себациновая кислоты. Их уровень в трутневом расплоде составляет 42% от общего содержания в маточном молочке.

В качестве пищевого продукта трутневый гомогенат обладает немалой пищевой ценностью – в гомогенате содержится много белка, жирных кислот, липидов, витаминов и минералов. Одним из ключевых особенностей гомогената трутневого расплода это наличие стероидов (тестостерона, прогестерона и эстрадиола (Будникова Н. В. и др., 2021; Митрофанов Д. В. и др., 2021).

Получают трутневый гомогенат из личинок достигших 10–12-дневного возраста. До появления зачатков глаз, ног и крыльев в виде фиолетовых пятен, восковую печать аккуратно подрезают, вынимая трутней из рамок при помощи медогонки. Затем измельченные личинки растирают смесью лактозы и глюкозы в соотношении 1:1 по их массе. К 1 части трутневого гомогената добавляют 6 частей смеси сахаров. Полученную массу высушивают в течение 3 месяцев при температуре 4–6 °C. Конечный продукт способен сохраняться до трех лет при комнатной температуре (Николаева Л. И., 2021; Синельникова В. П. и др., 2022; Sławomir Bakier; Marcin Stocki, 2016; A. B. Jensen et al., 2016).

Богатый химический состав трутневого расплода благоприятно влияет на высокую степень биологической активности и оказывает благотворное влияние на организм животных, птиц и человека. Этот лечебный эффект встречается в описании ученых при использовании как на животных, так и при воздействии на людей, оказывает положительный эффект при лечении остеопороза, гипотиреоза, бесплодия у мужчин, заболеваний печени, а также для защиты плода, процесса старения клеток, повышения и поддержание иммунного статуса (Муравьев Д. В., 2015; Бухарметова Э. В., 2021; Николаева Л. И., 2021; Аскарова Л. А., 2022).

Гомогенат представляет собой порошкообразное вещество желтого цвета с легким сладковатым и хлебным вкусом, а также специфическим запахом. Он не содержит механических примесей, полностью растворяется в воде, не обладает токсичностью и патогенностью (Соколов А. А. и др., 2016).

Химический состав гомогената включает 51,2% белка, состоящего из 16 общих и 28 свободных аминокислот. Жирные кислоты, представленные в гомогенате, включают миристиновую, пентадекановую, пальмитиновую, стеариновую, линолевую, линоленовую, арахидоновую и деценовую. Также в трутневом гомогенате представлены липиды – в основном мононасыщенными (50%), насыщенными (45%) и полиненасыщенными (5%) жирными кислотами. В состав его входят макро- и микроэлементы (Будникова Н. В. и др., 2017; Янкина О. Л. и др., 2017; Стребкова А. Ю. и др., 2020; Магомедов М. Ш. и др., 2023).

В продукте содержится набор витаминов следующего содержания (в миллиграммах на 100 миллилитров): β+j – токоферол – 600; α–токоферол – 370; витамины группы В (В1-В6); β – каротин. Присутствуют также желчные кислоты (в микрограммах на миллилитр): холестерол – 0,13, дезоксихолевая – 1,35, урсодезоксихолевая – 0,043, литохолевая – 1,3 (согласно данным И. А. Прохода, 2009). В расплоде пчел имеется 0,307±0,015 нмоль/100 г тестостерона; 410,0±65,4 нмоль/100 г пролактина; 51,32 ± 8,69 нмоль/100 г прогестерона и 677,6±170,3 нмоль/100 г (Achkasov E. E., Mashkovskiy E. V. et al., 2018).

В различных странах личинки трутней широко используются в качестве популярного средства для лечения и как продукт с высоким содержанием калорий. Согласно исследованию Л. Г. Чугуновой, Л. А. Бурмистровой, А. Н. Рябкова (1999), существует вероятность использования гомогената в терапии заболеваний, связанных с щитовидной железой. Рекомендации А. Г. Бачинского, А. Н. Децина (1998) включают употребление его в составе различных косметических кремов. Так же исследование коллектива авторов отмечают эффективность порошков, созданных на основе личинок трутней, маток и пчел, в лечении туберкулеза (Влияние апипродукта на…, 2012).

З. А. Галиева и др. (2023) установила, что применение трутневого гомогената в дозе 0,05, 0,01 и 0,015 мг/кг способствовало увеличению массы тела, благодаря повышению усвояемости корма и значительному увеличению среднесуточных привесов у овец романовской породы. По данным А. I. Ivanov (2014, 2019), в исследованиях, проведенных ранее, внесение в рацион животных трутневого гомогената также способствовало значительному улучшению биохимических показателей качества мяса и увеличение живой массы ягнят. Биохимическая активность трутневого гомогената описана в работах Г. Н. Ишмуратова и др. (2013), Л. Л. Деминой и др. (2017), которые обосновывают высокую биологическую активность трутневого гомогената богатым и разносторонним химическим составом. У кур применение трутневого гомогената способствовал улучшению функции кроветворения (Муравьева Д. В. и др., 2015). Хорошие результаты получены при лечении трутневым гомогенатом со свекольным соком при бабезиозе. На фоне применения трутневого гомогената значительно улучшались показатели естественной резистентности и продуктивности птиц (Червяков Д. Э., Луцук С. Н. и др., 2019). Н. В. Ефанова и др. (2019) установили полное восстановление в организме собак, под влиянием, экстракта трутневого гомогената минерального баланса, гематологических и биохимических показателей метаболизма, гормонального статуса щитовидной железы, улучшение и повышение у собак служебных показателей.

По данному разделу обзора литературы следует заключить, что трутневый гомогенат вызывает разносторонние интересы к его изучению. Но эти исследования являются чаще всего посвященными к конкретному вопросу, ситуации, нарушению какого-то конкретного звена в системе организма. В этой связи мы сочли необходимым проведение комплексных исследований влияния трутневого гомогената и других БАПП на организм, результаты которой представлены в настоящей работе.

1.2.3. Возможности применения прополиса в перепеловодстве

Прополис, известный как один из основных продуктов, производимых медоносными пчелами, долгое время применяется в народной медицине из-за его разнообразных положительных воздействий на организм. В настоящее время этот природный материал используется как исходное вещество для создания различных экстрактов, которые могут служить активными компонентами в фармацевтических примесях. Сырой прополис представляет из себя натуральный, похожий на клей смесь, собираемый медоносными пчелами, в основном из цветочных и листовых почек различных видов растений. В целом, прополис состоит из растительных смол и эфирных масел, пчелиного воска и пыльцы. Из органических соединений, которые были идентифицированы в прополисе выделяют: полифенолы, терпены, эфиры, аминокислоты, витамины, минералы и сахара (Юшкова Л. Я. и др., 2019; Шикова Ю. В. и др., 2020; Кусова Ю. В. и др., 2023; Popova M. et al., 2017; Okinczyc P. et al., 2020; Hossain R. et al., 2022; Wieczorek P. P. et al., 2022).

Медоносные пчелы применяют прополис, прежде всего, как теплоизоляционный материал, герметично закрывая трещины в деревянных стенках и прочих элементах улья. Также он играет значительную роль в формировании коллективного иммунитета (Грибков А. А., 2016; Бушкарева А. С. и др., 2019).

Прополис содержит разнообразные химические компоненты, такие как полифенолы, терпеноиды, аминокислоты, сахара, стероиды, минералы и витамины. Важными